The role of genetic factors in the development of liver cirrhosis in viral hepatitis B/D

Full Text

Введение Для корреспонденции: Хикматуллаева Азиза Сайдулла- евна, канд. мед. наук, ст. науч. сотр. НИИ вирусологии МЗ РУз, Цирроз печени (ЦП) занимает значительное е-mail: aziza9999@rambler.ru место в структуре заболеваний органов пищеварения, оставаясь крайне актуальной социальноэкономической и клинико-эпидемиологической проблемой здравоохранения всех стран мира. Это связано с широкой распространенностью их основных этиологических факторов в виде перси- стирования гепатотропных вирусов, а также высоким уровнем смертности [2, 5, 9]. По данным ВОЗ, за последние 20 лет показатель смертности от ЦП возрос до 10-20 случаев на 100 000 населения в год. В США ежегодно от терминальной печеночной недостаточности на фоне алкогольно-вирусного поражения печени умирает до 20 000 человек. На сегодняшний день ЦП как причина смерти занимает 10-е место и входит в 6 основных причин у лиц наиболее трудоспособного возраста 35-55 лет [4]. Отмечается рост больничной летальности за период с 2005 по 2007 гг. с 20 до 30% [4, 12]. В этой связи одной из наиболее важных проблем современной медицины является изучение предикторов прогрессирования хронических вирусных гепатитов в ЦП. В последние годы активно ведется поиск генетических детерминант в качестве ранних маркеров риска развития ЦП. Именно полиморфизм генов отвечает за реакции, которые возникают у конкретного человека при действии различных факторов. В последние годы доказана значимость полиморфизмов гена ГЬ28В, как предиктора достижения устойчивого вирусологического ответа. В 2009 г. Y. Tanaka и соавт. [21] при обследовании азиатов с генотипом 1 HCV обнаружили в 19-й хромосоме в близи гена ГЬ28В дополнительную полинуклео- тидную последовательность rs8099917, среди аллелей которой Т-аллель была мажорной, а G-аллель - минорной [8, 18, 21]. Встречались единичные исследования, посвященные влиянию ГЬ28В полиморфизма на эффективность лечения хронического гепатита В. Также не установлено взаимосвязи между полиморфизмом ГЬ28В и последствиями гепатита В [14]. Хронический гепатит D (ХГО) - преимущественно тяжелое, неуклонно прогрессирующее заболевание печени с высоким процентом прогрессирования заболевания. В 70-80% случаев отмечено быстро прогрессирующее течение хронического гепатита D, которое приводит к формированию ЦП. ХГD отличается неблагоприятным прогрессирующим течением. Таким образом, ХГО - тяжелая форма хронического вирусного гепатита, которая развивается при супер-инфицировании HDV у больных ХГВ или носителей HBV. Прогрессирование фиброза печени у больных хроническими вирусными гепатитами в целом линейно зависит от распространенности воспалительных изменений в печени. Соответственно она существенно отличается у разных пациен- ORIGINAL INVESTIGATIONS тов. Однако прогрессирование болезни не у всех больных является линейным, так как в некоторых случаях гистологические изменения могут оставаться относительно стабильными, а затем быстро прогрессируют [20]. Независимыми факторами риска прогрессирования фиброза являются мужской пол, возраст на момент инфицирования (прогрессирование происходит быстрее у пациентов, заразившихся в возрасте старше 40 лет), инфицирование другими вирусами, например, ВИЧ и ежедневное употребление более 50 г алкоголя [23, 19]. Скорость прогрессирования фиброза зависит также от состояния иммунного ответа, в частности продукции и функции цито- токсических Т-лимфоцитов и синтеза цитокинов [13, 16]. Следует отметить, что вероятность прогрессирования болезни не ассоциируется с генотипом HCV или вирусной нагрузкой [17]. Мы не встретили ни одного исследования по влиянию полиморфизма ГЬ28В-гена на прогноз исхода вирусного гепатита D. Приведенные данные свидетельствуют, что ЦП по-прежнему остается актуальной проблемой здравоохранения, не решены многие вопросы, в том числе касающиеся факторов, влияющих на прогрессирование фиброза. Это побудило к поиску новых факторов риска развития ЦП. Цель исследования - изучение влияния генетических вариаций ГЬ28В-гена человека на развитие ЦП и возможность прогноза исхода заболевания у HDV-инфицированных пациентов. Материалы и методы Для оценки влияния IL28B rs8099917 SNP среди исследуемых групп определялся генотип rs8099917 в IL28B локусе TaqMan SNP геноти- пированием у 94 лиц, в том числе у 72 пациентов с ЦП, ассоциированным с HDV-инфекцией. Для сравнения взята группа из 22 больных ЦП HBV этиологии. Длительность и выраженность заболевания была различной. Всем больным проводили общепринятые биохимические, серологические и инструментальные методы обследования. Молекулярно-генетические исследования включали ПЦР крови для определения ДНК HBV и РНК HDV Генотип rs8099917 IL28B локуса определяли в реакции циклического сиквенса с использованием праймеров, адаптированных для определения генотипов SNP rs8099917. Исследования, посвященные изучению исходов хронической дельта-инфекции, показали, что большую часть пациентов с ЦП составляют HDV- инфицированные больные. HDV ЦП в отличии от HBV ЦП протекал более остро, с выраженными клиническими проявлениями и частыми обострениями. оригинальные исследования Результаты Из 72 пациентов с ЦП, ассоциированным с HDV-инфекцией, мужчин было 40 (55,6%), женщин - 32 (44,4%). Возраст больных колебался от 17 до 56 лет, в среднем составил 31,2 ± 1,6 года. Степень поражения печени оценивали по шкале Child-Pugh.По тяжести и выраженности проявлений заболевания класс А определен у 20 (27,8%), В - 22(30,6%), класс С - у 30 (41,6%) больных. Анализ SNP rs8099917 гена IL28B показал, что в данном исследовании у больных ЦП в исходе гепатита D, Т-аллель была мажорной, а G - минорной. У 45 (62,5%) человек выявлен rs8099917TT генотип, TG гетерозиготный генотип определялся у 24 (33,3%), GG-генотип - у 3 (4,2%) пациентов. При ЦП в исходе вирусного гепатита В мужчин было 12 (54,5%), женщин - 10 (45,5%) человек, средний возраст пациентов составил 45,3 ± 2,5 года. Отнесены к классу А 12 (54,5%), к классу В7 (31,8%) и к классу С3 (13,7%) пациента. При ЦП HBV-этиологии генотипы распределялись следующим образом: rs8099917 ТТ-генотип в 4 (18,2%), гетерозиготный TG генотип определялся в 18 (81,8%) случаях и ни у одного больного не выявлялся GG-генотип. Показатели SNP rs8099917 гена IL28B значительно при ЦП HBV-этиологии и HDV ЦП как по аллели Тт (p < 0,001), так и по аллели TG (p < 0,001). Обсуждение ЦП является одним из вариантов исхода хронических заболеваний печени. Несмотря на очевидные успехи в гепатологии, у части больных заболевание незаметно переходит в ЦП и выявляется только на этой стадии. Необходимость изучения ЦП обусловлена развитием тяжелых осложнений и высокой частотой инвалидизации больных. На сегодняшний день ЦП как причина смерти занимает 10-е место и входит в 6 основных причин смерти у лиц наиболее трудоспособного возраста 35-55 лет [4]. Следует заметить, что общая смертность, обусловленная ЦП, варьирует в различных странах. Так, в Европе она колеблется от 4,6 на 100 000 жителей в Норвегии, до 103,8 на 100 000 человек в Молдове [10]. В азиатском регионе (на примере Тайваня) летальность, обусловленная ЦП, - 41 случай на 100 000 населения [22]. При этом довольно часто нет клинических или лабораторных признаков прогрессирования заболевания. Важно заметить, что более чем у 50% больных манифестация болезни может происходить только в декомпенсированной стадии, наличие которой свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания, когда более чем у 70% больных в качестве единственного метода лечения предлагается трансплантация печени, проведение которой ограничено по ряду причин [1, 3, 6, 7, 15]. В этой связи одной из наиболее важных проблем современной медицины является изучение предикторов прогрессирования хронических вирусных гепатитов в ЦП. В последние годы активно ведется поиск генетических детерминант в качестве ранних маркеров риска развития ЦП. Выявлено, что наиболее частым изменением структуры генов является однонуклеотидный полиморфизм (SNP), обусловленный точечными мутациями в определенных позициях ДНК, для которых в той или иной популяции существуют различные варианты последовательностей. Именно полиморфизм генов отвечает за реакции, которые возникают у конкретного человека при действии на организм различных факторов. В настоящее время клиницисты уже используют генетический маркер SNP в позициях rs12979860 и rs8099917 гена ГЬ28В. В последние годы доказана значимость полиморфизмов гена ГЬ28В, кодирующего интерферон лямбда 3-го типа и расположенного на 19-й хромосоме, как предиктора достижения устойчивого вирусологического ответа [11]. Встречались единичные исследования, посвященные влиянию ГЬ28В полиморфизма на эффективность лечения хронического гепатита В. Ученые не обнаружили значительных связей между полиморфизмом данного гена и гепатитом В. Также не установлено взаимосвязи между полиморфизмом ГЬ28В и последствиями гепатита В [14]. Не проводилось исследований по изучению влияния генетических детерминант человека. Мы не встретили ни одного исследования по влиянию полиморфизма ГЬ28В-гена на прогноз исхода вирусного гепатита D. Это побудило нас проанализировать связь полиморфизмов IL28B гена с ЦП вследствие гепатита D. Принимая во внимание приведенные литературные данные, мы поставили целью исследований изучение влияния генетических вариаций ГЬ28В- гена на риск развития ЦП и возможность прогноза исхода заболевания у HDV-инфицированных пациентов. Результаты проведенных исследований показали, что распределение генотипов ГЬ28В при ЦП- индуцированном HDV-инфекцией, значительно отличалось от ЦП HBV этиологии как по rs8099917 ТТ-генотипу (p < 0,001), так и по rs8099917 TG генотипу (p < 0,001). Традиционные факторы риска развития ЦП (пол, возраст, вирусная нагрузка, сопутствующие заболевания) мало влияли на исход хронических вирусных гепатитов. Геномный скрининг SNP в rs8099917 IL28B-гена позволяет разработать стандартный подход к прогнозированию индивидуальной предрасположенности к HDV- инфекции и возможности риска развития ЦП. Возникает вопрос о максимально раннем начале профилактических мероприятий и, следовательно, об индивидуальных критериях повышенного риска развития ЦП. Заключение Результаты проведенных исследований показали, что распределение генотипов при ЦП, индуцированных HDV, значительно отличалось от ЦП HBV-этиологии, как по ТТ-генотипу, так и TG- генотипу. Таким образом, генетический анализ - это перспективный метод неинвазивной диагностики риска развития ЦП. Преимущество генетических маркеров состоит в том, что они несут информацию о предрасположенности к заболеванию и его исходу независимо от других факторов как окружающей среды, так и индивидуальных особенностей организма. Необходимо продолжить дальнейшее изучение значимости в прогрессии хронического гепатита D rs8099917 IL28B-гена, как предиктора возможного формирования ЦП. Геномный скрининг SNP позволит разработать стандартный подход к прогнозированию предрасположенности к различным заболеваниям. Исследования и подготовка статьи не имели финансовой поддержки. Конфликта интересов в статье не было.

About the authors

Aziza S. Khikmatullaeva

Scientific-Research Institute of Virology

Email: aziza9999@rambler.ru
MD, PhD, Senior researcher, Scientific Secretary of the Scientific - Research Institute of Virology 7a, Yangishahar, Tashkent, 100194, Uzbekistan

E. I Musabaev

Scientific-Research Institute of Virology

7a, Yangishahar, Tashkent, 100194, Uzbekistan

References

Supplementary files