SUSTAINABLE TRENDS IN THE FREQUENCY OF HEMOTRANSMISSIVE INFECTIONS IN DONORS OF BLOOD AND ITS COMPONENTS

Full Text

По данным Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, в 2016 г. наблюдалась устойчивая тенденция к снижению заболеваемости как хроническими, так и острыми формами парентеральных вирусных гепатитов, вызванных вирусами гепатита В и С (ВГВ и ВГС), более чем на 5% и 13-15%, соответственно, по сравнению с 2015 г. В то же время заболеваемость инфекцией, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), увеличилась почти на 1%*. Поскольку пул доноров крови и её компонентов формируется из общей популяции, данные по частоте выявления инфекционных маркеров у доноров крови и ее компонентов могут являться индикатором уровня инфицированности здорового населения в целом. Это подтверждается тем, что у доноров крови также отмечено наличие разнонаправленных тенденций в частоте обнаружения инфекционных маркеров гемотрансмиссивных вирусных инфекций, а именно: снижение для ВГВ- и ВГС-инфекции, но увеличение для ВИЧ-инфекции. Чаще у доноров крови выявляются маркеры ВГС-инфекции [1]. В образцах крови доноров ФГБУ «НМИЦ гематологии» ранее показано статистически значимое снижение частоты выявления маркеров ВГВ и ВГС, таких как поверхностный антиген ВГВ (HBsAg) и антитела к белкам ВГС (анти-ВГС), за период с 1999 по 2014 гг: с 0,38% до 0,12% (χ2 = 17,18, р = 0,00003) и с 0,71% до 0,37% (χ 2= 13,11, р = 0,0003), соответственно [2]. Однако нет данных по динамике выявления у доноров крови и ее компонентов в последние годы таких инфекционных маркеров, как антитела к ядерному антигену ВГВ (анти-НВс) и антитела к возбудителю сифилиса. Недостаточно данных о различии выявления маркеров инфекций, в том числе дополнительных, среди первичных и повторных доноров. Цель исследования - показать динамику выявления инфекционных маркеров у первичных и повторных доноров крови и ее компонентов ФГБУ «НМИЦ гематологии». Материалы и методы В исследование были включены 103 716 образцов крови доноров, пришедших на донацию в ФГБУ «НМИЦ гематологии» в период с 1 января 2010 г. по 31 декабря 2017 г. Проанализировано 39 514 образцов крови 10 354 доноров, пришедших на донацию в период с января 2015 г. по декабрь 2017 г.: 7654 - от первичных доноров и 31 860 - от повторных. Возраст доноров варьировал от 18 до 70 лет, медиана возраста - 33 года. Распределение по полу было следующим: мужчин - 6036 человек, женщин - 4318. Доноры в возрасте 18-30 лет составляли 49,1% от общего числа. Серологические маркеры выявляли в образцах крови доноров методом иммуноферметного (ИФА) и иммунохемилюминесцентного анализа (ИХЛА). ИФА-диагностику осуществляли в автоматическом (на приборе Evolis, «Bio-Rad») и ручном (с помощью спектрофотометров и отмывающих устройств фирм «Bio-Rad» и «Tecan») режимах. Использовали наборы реагентов производства фирмы «Bio-Rad» - Джинскрин ультра ВИЧ Аг/Ат, Monolisa HBsAg Ultra, Monolisa НВsAg (с нейтрализацией) подтверждающий, Monolisa anti-HCV Plus, version 2, Monolisa anti-HBc Plus; ЗАО «Вектор-Бест» - НВsAg-ИФА-БЕСТ, НВsAg-подтверждающий-ИФА-БЕСТ, ВектоНВsAg-антитела, ВектоНВсAg-антитела, ВектоНВсAg-IgM, Бест анти-ВГС (комплект 3), Бест анти-ВГС (комплект 4), РекомбиБест антипаллидум-суммарные антитела (комплект 3/авто); «Abbott-Мюрекс»-Мюрекс анти-НСV; «Орто-Кайрон» - Иммуноблот РИБА-ИБ; ЗАО «Эколаб» - ИФА-НВsAg-0,01, ИФА-ВГС; «Ниармедик» - Гепастрип; ООО НПО «Диагностические системы» - ДС-ИФА-HBsAg-0,01, ИФА-АНТИ-HCV. ИХЛА проводили на приборе Architect с помощью наборов реагентов HIV Ag/Ab Combo, HBsAg Qual II, anti-HCV, anti-HBc II производства фирмы «Abbott». Для подтверждения ИХЛА-положительных образцов использовали иммуноблот Inno-LIA HCV Score Innogenetics и подтверждающий тест HBsAg Qualitative Confirmatory. Скрининговое ПЦР-исследование на наличие нуклеиновых кислот ВИЧ, ВГС и ВГВ образцов плазмы доноров проводили в пулах из 6 проб с помощью автоматических анализаторов Cobas Ampliprep и Cobas Taqman (Roche, Швейцария) с использованием мультиплексного дискриминационного теста Сobas TaqScreen MPX Test, version 2.0. В случае обнаружения любых инфекционных маркеров все компоненты крови были подвергнуты выбраковке и утилизации. Результаты Изменение доли забракованных по инфекционным маркерам донаций крови и ее компонентов в ФГБУ «НМИЦ гематологии» с 2010 по 2017 гг. представлено в табл. 1. Как видно из табл. 1, ежегодное число донаций за исследуемый период существенно не менялось. Маркеры ВИЧ-инфекции выявлялись менее чем в 1% случаев, а с 2013 г. отмечено значительное (в 10 раз) снижение частоты выявления анти-ВИЧ. Маркеры ВГВ и ВГС (HBsAg и анти-ВГС) в 2010 г. были причиной брака 0,6% и 1,4% компонентов крови, а в 2017 г. - только 0,07% и 0,14%, соответственно. Антитела к возбудителю сифилиса были выявлены в 2010 г. в 0,9% случаев, в 2013-2014 гг. - в 0,3%, а в 2017 г. - только в 0,07% случаев. Дополнительно с марта 2014 г. определялись анти-НВс. Данный маркер встречался в образцах крови доноров в 2014 г. на начальном этапе в 4,2% случаев, затем вследствие отстранения от донорства серопозитивных лиц выявляемость анти-НВс снизилась до 1,92% в 2015 г., до 0,76% - в 2016 г., до 0,55% - в 2017 г. В период с 2015 по 2017 гг. были проанализированы данные о количестве лиц, отведенных от донорства из-за наличия инфекционных маркеров, впервые пришедших на донацию и регулярно сдающих кровь и ее компоненты (табл. 2). С 2015 по 2017 гг. наблюдалось увеличение доли повторных доноров с 40,6% до 65,4% и их вклада в общее число донаций. Так, в 2015 г. число донаций повторных доноров превышало число донаций первичных доноров в 2,4 раза, в 2016 г. - в 5,2 раза, а в 2017 г. - уже в 6,6 раз. При этом, среднее число донаций на одного повторного донора в год за исследуемый период времени не изменилось и составляло 3,5. Наличие у первичных, либо появление у повторных доноров анти-ВИЧ стало причиной отвода в 2015 г. двух человек, а в 2016 г. и 2017 г. - 5 и 2, соответственно. HBsAg был выявлен только в образцах крови первичных доноров, и их доля составляла от 0,13 до 0,37%, т.е. 1:745 донаций в 2015 г., 1:268 донаций в 2016 г. и 1:596 донаций в 2017 г. В то же время ДНК ВГВ была обнаружена лишь у одного повторного донора крови и ее компонентов, т.е. 1:31 860 серонегативных донаций. За исследуемый период частота обнаружения анти-НВс в образцах крови первичных доноров снизилась с 4,67% до 3,63%, а в образцах крови повторных доноров - почти на порядок (с 2,01% до 0,24%). У 6 из 5758 ранее обследованных повторных доноров обнаружено появление анти-НВс. В двух случаях подтверждено наличие ВГВ-инфекции у доноров, поскольку были выявлены и другие маркеры вируса, в том числе ДНК. У одного донора кроме наличия антител к ядерному антигену вируса гепатита В обнаружена ВИЧ-инфекция. Анти-ВГС встречались как у первичных, так и у повторных доноров, частота выявления составила от 0,09% до 0,32%. В связи с детекцией РНК ВГС в 2016 г. были отведены 3 повторных донора, а в 2017 - 1. Антитела к возбудителю сифилиса были выявлены чаще у первичных доноров (0,09-0,35%), но в одном случае было зафиксировано их появление у повторного донора. В табл. 3 представлен титр антител к поверхностному антигену ВГВ (анти-HBs) в образцах крови доноров, совершавших донации крови или ее компонентов в 2017 г., при отсутствии других инфекционных маркеров. Анализ концентрации анти-HBs показал, что защитный титр отсутствовал у 75 из 100 человек, причем 54 из них - это лица старше 31 года. Анти-HBs в защитном титре (>10 мМЕ/мл) присутствовали у 25 из 100 доноров, преимущественно у лиц моложе 30 лет (n = 18). Обсуждение За исследуемый период отмечена тенденция к уменьшению частоты выявления инфекционных маркеров в образцах крови доноров крови и ее компонентов, причем для некоторых инфекций отмечено снижение более чем на порядок. Сравнение с эпидемиологическими данными показало, что эта тенденция наблюдается только среди доноров в ФГБУ «НМИЦ гематологии» и не распространяется на общую популяцию в целом. Ранее было показано, что более 80% доноров, в образцах крови которых были обнаружены HBsAg и анти-ВГС, являлись первичными, что позволяет рассматривать их как своеобразную группу риска в виду возможности передачи вирусных агентов реципиентам компонентов крови [3]. Другими авторами представлены похожие данные, согласно которым маркеры гемотрансмиссивных инфекций встречаются значительно реже у регулярных доноров по сравнению с лицами, впервые пришедшими на донацию крови и ее компонентов [4, 5]. Стратегия развития донорства крови и её компонентов включает популяризацию донорства среди молодежи, полный переход на безвозмездное донорство и поощряет заготовку от повторных доноров. В целях повышения безопасности трансфузий компонентов донорской крови донор подлежит отстранению от донорства в случае выявления любого инфекционного маркера в образце крови. В результате постепенно формируется когорта свободных от маркеров инфекций доноров, регулярно сдающих кровь и ее компоненты. Доказательством этого факта является рост числа повторных доноров по сравнению с числом первичных доноров в ФГБУ «НМИЦ гематологии» с 2015 г. по 2017 г. В 2015 г. цчисло донаций повторных доноров превышало число донаций первичных доноров в 2,4 раза, в 2016 г. - в 5,2 раза, а в 2017 г. - уже в 6,6 раз. При этом среднее число донаций одного донора в год за исследуемый период времени не изменилось и составляло 3,5. Таким образом, подавляющее число компонентов крови было заготовлено от повторных доноров. Уровень инфицированности «здорового» населения коррелирует с аналогичным показателем у первичных доноров. Так, доля ВИЧ-инфицированных среди первичных доноров ФГБУ «НМИЦ гематологии» выросла в период 2015-2017 гг. с 0,03% до 0,11%. Среди повторных доноров число ВИЧ-инфицированных лиц не увеличилось. Кроме того, другие инфекционные маркеры в крови повторных доноров также были выявлены реже. Частота обнаружения анти-НВс у доноров ФГБУ «НМИЦ гематологии» за исследуемый период снизилась с 4,20% до 0,55%, что свидетельствует о формировании устойчивой когорты повторных анти-НВс-негативных доноров. У повторных доноров случаи появления анти-НВс в качестве нового маркера редки. Только в образце крови одного донора удалось обнаружить ДНК ВГВ в низком титре, что характерно для скрытой формы ВГВ-инфекции. В остальных 5 случаях анти-НВс изолированные или в сочетании с антителами к другим антигенам вируса были прямым свидетельством инфицированности ВГВ, при невыявлении ДНК-вируса, концентрация которой могла быть ниже чувствительности используемого набора реагентов. В образцах крови первичных доноров частота обнаружения анти-НВс снизилась с 2015 г. с 4,67% до 3,63% в 2018 г., что может быть связано с изменением политики в области привлечения исключительно добровольных безвозмездных доноров крови. Еще одним фактором, играющим важную роль в этом процессе, является вакцинация против гепатита В. Почти половина (48%) доноров ФГБУ «НМИЦ гематологии» за период данного исследования - это молодые люди, рожденные после 1988 г. и вакцинированные в возрасте 13 лет. Можно предположить, что в ближайшие годы встречаемость анти-НВс в донорской популяции и дальше будет снижаться, поскольку к 2016 г. 18-летнего возраста достигли лица, вакцинированные от гепатита В при рождении (в 1998 г. в календарь профилактических прививок включена вакцинация новорожденных против вирусного гепатита В [6]), и часть этой популяции может пополнить ряды доноров крови и ее компонентов. До 2004 г. у каждого 5-го невакцинированного донора были определены лабораторные признаки инфицирования ВГВ (присутствие анти-НВс в крови), а наличие скрытого гепатита В было подтверждено у 1% доноров крови [7]. Вакцинация является самым эффективным и экономически выгодным профилактическим мероприятием, известным современной медицине. У каждого второго ребенка, инфицированного в возрасте до одного года ВГВ, формируется хроническая форма инфекции с высоким риском развития цирроза и рака печени, а уровень серопозитивности HВsAg у детей, привитых позже 7 cen с момента рождения, более чем в 3 раза превышает таковой у детей, привитых в роддоме [8]. Факт обнаружения ДНК ВГВ и РНК ВГС в образцах крови повторных доноров показывает высокую информативность исследования на молекулярные маркеры именно у этой категории доноров крови и ее компонентов, поскольку позволяет выявлять инфицирование на ранних сроках. При лабораторном обследовании первичных доноров большее значение имеют серологические исследования, в том числе на наличие дополнительного маркера - анти-НВс. Заключение Таким образом, за последние 8 лет в ФГБУ «НМИЦ гематологии» наблюдается устойчивая тенденция к снижению частоты обнаружения маркеров гемотрансмиссивных инфекций у доноров крови и ее компонентов. Это является результатом воздействия ряда факторов, таких как: снижение заболеваемости вирусными гепатитами В и С в РФ, вакцинопрофилактика против вирусного гепатита В, реализация стратегии развития безвозмездного донорства, введение расширенного лабораторного скрининга с отстранением от донорства серопозитивных лиц. Существенный вклад принадлежит преимущественной заготовке компонентов крови от повторных доноров.

About the authors

Tatyana A. Tupoleva

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

Email: ttupoleva@mail.ru
Candidate of Medical Sciences. Head of Department, Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology» 4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

D. S Tikhomirov

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

Email: tihomirovgnc@bk.ru
4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

A. A Gulyaeva

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

Email: a1573@mail.ru
4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

E. N Ovchinnikova

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

M. V Demin

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

Email: memindisha@gmail.com
4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

T. V Gaponova

Federal State Budgetary Institution «National medical research center of Hematology»

Email: gaponova.tatj@yandex.ru
4, Novyy Zikovskiy proezd, 125167, Moscow, Russia

References

Supplementary files