Сезонные колебания маркеров H. pylori у больных острыми вирусными гепатитами

Полный текст

Helicobacter pylori (Нр) является частью индиген-ной биоты желудка, эта грамотрицательная бактерия может посылать и принимать сигналы от клеточных компонентов в слизистой желудка, модулировать иммунный ответ и клеточные процессы хозяина, что позволяет хозяину и бактерии существовать в динамическом равновесии [1, 2]. Избирательная колонизация Нр эпителия желудка вызывает развитие хронического воспаления слизистой оболочки и признана безусловным фактором развития рака желудка и MALT-лимфомы [3, 4]. В последние годы появились новые данные о Нр, стратегии вирулентности этого микроба, активности важных бактериальных детерминант, непосредственно взаимодействующих с клетками и тканями хозяина и модулирующих разнообразные факторы хозяина, - ЛПС, секрети-руемых белках CagA и VacA, адгезинах и др. [2, 3, 5-12]. В частности, установлено присутствие Нр в ткани печени, желчного пузыря, желчных ходах и Для корреспонденции: Белая Ольга Федоровна, д-р мед. наук, проф., зав. лаб. по изучению токсических и септических состояний НИИ Молекулярной медицины ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, ofbelaya@mail.ru однонаправленное влияние этого микроба и вирусов гепатита при острых и хронических вирусных гепатитах и злокачественной трансформации [3, 7, 8, 10]. Как известно, интоксикационный синдром при многих инфекционных и неинфекционных заболеваниях обусловлен липополисахаридами грамо-трицательной флоры и другими сходными с ними по действию патогенассоциированными молекулами (PAMPs), он отягощает течение и вирусных инфекционных заболеваний, например вирусных гепатитов [13]. В ранее проведенных исследованиях мы установили значительное присутствие ЛПС/О-антигена Нр при интоксикации, наблюдаемой при острых вирусных гепатитах (ОВГ) с холестатиче-ским синдромом, в том числе снижение формирования специфических иммунных комплексов в крови, состоящих из IgG-антител и ЛПС/О-антигенов сопутствующей патогенной флоры кишечника [14]. Эспериментально показано, что даже хроническая низкодозовая стимуляция ЛПС Нр может прими-ровать нейтрофилы в слизистой желудка, стимулированной другими медиаторами, к избыточному выбросу вредных веществ [15]. Наряду с ЛПС/О- 17 ЭПИДЕМИОЛОГИЯ И ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ, № 2, 2014 антигеном Нр представляется интересным и необходимым изучение присутствия других факторов патогенности - вакуолизирующего цитотоксина VacA и онкопротеина CagA у больных ОВГ. Целью работы являлось изучение сезонных особенностей выявления ЛПС/О-антигена, VacA и высокомолекулярных белков - ВМБ (включающих CagA) в кале и в циркулирующих иммунных комплексах (ЦИК) сыворотки крови у больных ОВГ. Материалы и методы Всего было обследовано 90 больных ОВГ желтушной формы разной этиологии (HBV - 37; HCV - 6; HAV - 17; миксты - 30 (HDV + HCV -- 11; HBV + HCV - 18; HAV + HBV - 1). Из них у 30 человек выявлен холестатический синдром (далее - холестаз). В качестве контрольной группы обследовано 42 практически здоровых донора крови. Больные были обследованы многократно (3-6 раз) на протяжении острого периода и в периоде ранней реконвалесценции, от больных исследовали пробы кала и ЦИК, выделенных из сыворотки крови. В биосредах пациентов были тестированы ЛПС/О-антигены S. sonnei, S. flexneri 1-5, S. newcastle; Salmonella В, С1, С2, D, Е-серогрупп; Y. pseudotuberculosis I, III, Y. enterocolitica O3, 09, O7,8, O4,33, O6,30; E. coli O157; Campylobacter (C. jejuni, C. coli, C. lari); Hp, а также присутствие комплекса ВМБ (в том числе CagA) и маркера VacA Hp (антительные диагностикумы для постановки реакции коагглютинации на стеклах и планшетах были любезно изготовлены в НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи Минздрава России) [16-18]. Примененная реакция коагглютинации (РКА) основана на способности белка А золотистого стафилококка соединяться с Fc-фрагментом иммуноглобулинов IgG124. Полученный антительный диагностикум свободными Fab-фрагментами иммуноглобулинов соединяется со специфическими антигенами, что проявляется феноменом агглютинации стафилококков. Реакция видна невооруженным глазом, легко учитывается. Для выявления в качестве маркеров различных возбудителей термостабильных ЛПС/О-антигенов использовали РКА на стекле, для выявления маркеров (антигенов) ВМБ и VacA Hp - РКА на иммунологических планшетах. Подготовка проб и постановка реакции подробно описаны ранее [8]. Статистическая обработка данных проведена по программе Biostatistica для IBM PC с расчетом параметрических и непараметрических критериев Стьюдента и %2. Результаты и обсуждение По частоте выявления в копрофильтратах ЛПС/ О-антигены Hp занимали 1-е место (57,7% от общего числа 81,4% лиц, у которых были выявлены антигены сальмонелл , йерсиний, шигелл), при этом у больных ОВГ с холестазом положительные реакции на ЛПС/О-антиген Нр выявлены досто верно чаще, чем в группе больных без холестаза (р < 0,01). У доноров крови О-антигены разных возбудителей выявлены в копрофильтратах лишь у 16,6% обследованных (из них ЛПС/О-антигены Hp в 9,2%, что достоверно отличается от частоты их выявления у больных ОВГ (р < 0,01). В ЦИК сыворотки крови ЛПС/О-антиген Hp выявлен всего в 16,7%, при этом в группе больных с хо-лестазом - в 32%, без холестаза - достоверно ниже, в 7,1% случаев (р < 0,05). Эти данные свидетельствуют о том, что в целом наблюдается невысокое «включение» ЛПС/О-антигена Hp в специфические иммунные комплексы, и только при высокой антигенной нагрузке в кале (у больных ОВГ с холестазом) они выявляются в составе ЦИК у трети больных. С целью изучения частоты обнаружения других факторов - VaeA-цитотоксина и комплекса ВМБ-маркеров островка патогенности, включая CagA (имеющих большое значение в патогенезе хелико-бактерной инфекции), было обследовано 39 больных ОВГ различной этиологии. Из этого числа больных маркер VacA в составе ЦИК сыворотки крови выявлен у 49,5% , ВМБ - достоверно чаще, у 72,7% (p < 0,05). Частота выявления маркера ВМБ у больных ОВГ с синдромом холестаза и без него в составе ЦИК была также выше (80,5 и 68% соответственно), чем VacA (61 и 43% соответственно) (p < 0,05). В течение календарного года средняя частота выявления О-антигена была достоверно выше у больных, перенесших заболевание в январе-апреле (в 72,5% проб кала) в сравнении с перенесшими заболевание ОВГ в мае-августе (52,5% ; р = 0,023). В составе ЦИК сыворотки крови также более частое выявление О-антигена отмечено в январе-апреле (в среднем 43,8%), а мае-августе - реже (в среднем 9,5%; р < 0,001). Маркер VacA Нр найден в составе ЦИК сыворотки крови в январе-апреле в 40,9% проб, в мае-августе в 26% (р < 0,05), это соотношение сохранялось и в отдельных группах больных с холестатическим синдромом и без него. В ходе желтушного периода у больных ОВГ, наблюдавшихся нами в январе-апреле, на 1-й неделе желтухи уровень маркера VacA составлял 0,25 ± 0,05 (lg 10 обратного титра антигена), затем достоверно повышался к периоду разгара желтухи до 0,50 ± 0,07 (р1 = 0,006) и далее, в период стихания желтухи, -до 0,53 ± 0,075 (до уровня, достоверно более высокого, чем на 1-й неделе желтухи (р1 < 0,05). У больных, перенесших ОВГ в мае-августе , уровень VacA-антигена в ЦИК на 1-й неделе желтухи составлял 0,27 ± 0,095, затем незначительно повышался до 0,40 ± 0,11, а затем снижался до 0,15 ± 0,087, становясь достоверно ниже уровня у больных предыдущей группы (р = 0,017). В отличие от маркера VacA в ЦИК маркеры ВМБ у больных ОВГ встречались с одинаковой частотой в январе-апреле и мае-августе. Но при этом уровень ВМБ в составе ЦИК был выше, чем VacA, и у боль 18 ных ОВГ в январе-апреле отмечалось его достоверное нарастание к периоду разгара желтухи в сравнении с 1-й неделей желтухи ( р1 < 0,002), в то время как при заболевании в мае-августе его уровень на протяжении желтушного периода был достаточно монотонным. Полученные данные о более высокой частоте выявления ЛПС/О-антигена в кале и ЦИК и маркера Va-cA Hp в ЦИК у больных, перенесших ОВГ в январе-апреле, по сравнению с перенесшими его в мае-августе могут свидетельствовать о более интенсивной жизнедеятельности Нр в зимне-весенние месяцы года, а именно - его размножении в организме и продукции важного токсина. Вероятно, это связано с ослаблением клеточного иммунитета на фоне вирусного поражения печени у больных ОВГ, протекающего на фоне сопутствующего инфицирования Нр. Нам не удалось проследить сезонность в выявлении маркеров Нр в контрольной группе здоровых доноров крови, однако в целом тенденции выявления маркеров Нр у больных ОВГ соответствовали сезонным колебаниям О-антигена у практически здорового населения, по данным литературы [19]. Полученные данные соответствуют существующим представлениям о типичных сезонных обострениях язвенной болезни и отражают, видимо, возможные сезонные колебания фонового состояния общего иммунитета. Заключение В результате проведенного исследования установлено, что частота выявления ЛПС/О-антигена, а также частота выявления и уровни маркера VacA Hp у больных ОВГ различаются в желтушном периоде заболевания в зависимости от сезона года, в котором протекает заболевание, их показатели выше в зимне-весенние месяцы года (январь-апрель) по сравнению с летним периодом (май-август). Частота выявления ЛПС/О-антигена и маркера VacA Hp у больных ОВГ значительно превышает таковую у практически здоровых лиц (доноров крови). Мы считаем, что эти данные необходимо учитывать при оценке результатов диагностики хеликобактерной инфекции и результатов эрадикационной терапии.

Об авторах

Ольга Федоровна Белая

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России

д-р мед. наук, проф., зав. лаб. по изучению токсических и септических состояний НИИ молекулярной медицины

Светлана Николаевна Зуевская

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. по изучению токсических и септических состояний НИИ молекулярной медицины

Ольга Александровна Паевская

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. по изучению токсических и септических состояний НИИ молекулярной медицины

Юлия Владимировна Юдина

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова»

канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. по изучению токсических и септических состояний НИИ молекулярной медицины

Елена Васильевна Волчкова

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России

д-р мед. наук, зав. каф. инфекционных болезней МПФ

Сергей Григорьевич Пак

ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России

д-р мед. наук, проф., член-корр. РАМН, почетный зав. каф. инфекционных болезней МПФ

Список литературы

Дополнительные файлы