УРОВНИ СПОНТАННОГО И ИНДУЦИРОВАННОГО Γ-ИНТЕРФЕРОНА ПРИ ГРИППЕ И РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ

Полный текст

Актуальность проблемы В организме человека существуют около 20 видов интерферонов. Для удобства изучения интерфероны разделили на 3 группы по их молекулярному действию в зависимости от того, на какие рецепторы воздействует и какие механизмы запускает данный интерферон [1]. В основу классификации положены типы клеток, которые выделяют интерфероны: интерфе-рон-α - ИФН-α (лейкоцитарный, вырабатываемый лейкоцитами); интерферон-β (фибробластный, продуцируемый клетками соединительной ткани фибробластами); интерферон-γ - ИФН-γ (иммунный - вырабатывается лимфоцитами, макрофагами и природными киллерами) [2]. ИФН-α -интерферон, который синтезируется в культуре лейкоцитов, индуцированной вирусом; основные функции: противовирусная активность и активация естественных киллеров. ИФН-γ преимущественно продуцируется иммунологически стимулированной культурой лимфоцитов (Т-лимфоциты); главная функция - иммунорегуляция. Недавно открытый третий тип интерферон-λ является основным в ответе на интраназальное заражение вирусом. Интерфероны всех типов участвуют в многочисленных иммунных взаимодействиях при вирусных инфекциях, играя при этом ключевую роль [3]. Они способствуют как индукции, так и регуляции ответов врожденного и адаптивного противовирусных механизмов, активизируя многочисленные внутренние противовирусные факторы, влияя на активность макрофагов, NK-клеток, дендритных клеток и Т-лимфоцитов путей усиления презентации антигена, клеточной пролиферации и дифференциации, экспрессии профилей, приводя в конечном счете к усилению противовирусных эффекторных функций [4]. В 1986 г. академиком Ф.Н. Елиговым был предложен термин «интерфероновый» статус как интегральный критерий функционального состояния системы интерферона [5]. Роль γ-интерферона в регуляции факторов врожденного иммунного ответа является ключевой в реализации иммунной защиты организма человека от острых вирусных инфекций, таких как грипп и другие ОРВИ. Еще одним очень важным биологическим свойством γ-интерферона является наличие не только опосредованного, но и прямого неспецифического противовирусного действия. Известно, что некоторые вирусы гриппа способны к ингибированию как продукции, так и защитного действия интерферона первого типа [11, 12]. Сбой в системе интерферона, сниженный интерфероногенез свидетельствуют о неблагополучии функционирования организма, хронизации процесса, прогрессировании вирусной инфекции. В отечественных научных исследованиях на протяжении нескольких последних десятков лет показано, что такие состояния с полным или частичным выпадением различных звеньев системы интерферона (α- или γ-интерферона) являются прочной и/или следствием острых и хронически рецидивирующих вирусных инфекций [6-8]. Под влиянием вирусов может происходить повреждение системы интерферонов. Так, J. Schlender и соавт. показали, что респираторно-синцитиальный вирус ингибирует медиированную через Toll-подобные рецепторы 7, 9 продукцию α-интерферона и β-интерферона человеческими плазмоцитоидными дендритными клетками. Исследования И.В. Нестерова и соавт. (2002, 2003, 2005) свидетельствуют о том, что пациенты, страдающие повторными острыми респираторными инфекциями, как дети, так и взрослые, имеют разнообразные нарушения функционирования иммунной системы по типу вторичных иммунодефицитов (ИДС), чаще комбинированного характера, при этом ведущими дефектами являются нарушения в системе интерферона [11]. К настоящему времени хорошо изучены возрастные особенности интерфероновой системы у детей. Установлено, что у детей в возрасте от одного месяца до 3 лет способность к продукции интерферона снижена в 9 раз по сравнению со взрослыми пациентами. У некоторых детей в возрасте от 7 до 18 лет сохраняется незрелость системы интерферона [12]. Известно, что большинство цитокинов в норме отсутствует в сыворотке крови в определяемых количествах у здорового человека. В то же время способность клеток к выработке цитокинов при индукции позволяет составить представление о готовности иммунокомпетентных клеток к полноценному ответу, о наличии дефектов синтеза растворимых факторов, определяющих ход иммунного ответа, активность защиты от инфекций, интенсивность развития воспалительного процесса [13]. В норме у пациентов уровни сывороточного и спонтанного интерферона характеризуются низкими значениями, а индуцированного интерферона - высокими. Многочисленные факты указывают на наличие тесной взаимосвязи между уровнем продукции цитокинов и клиническими характеристиками инфекционного процесса [14]. В доступной литературе и электронных ресурсах отсутствуют сведения об особенностях циркуляции уровня спонтанного и индуцированного γ-интерферона при гриппе и ОРВИ. В этой связи изучение противовирусных эффектов γ-интерферона представляют большой интерес в плане обоснования лечения и профилактики острых респираторных вирусных заболеваний. Цель исследования - изучение изменения уровней спонтанного и индуцированного γ-интерфе-рона при гриппе и респираторно-синцитиальной инфекции в зависимости от этиологии заболевания, возраста пациентов и гендерных факторов. Материалы и методы В исследование включены 64 пациента, проходивших лечение в инфекционном отделении медико-санитарной части (МСЧ) Федерального медико-биологического агентства России г. Заречный Пензенской области в период 2014-2016 гг. Этиология ОРВИ и гриппа была верифицирована путем выявлением РНК и ДНК вирусов в носоглоточном секрете с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени. Забор материала производили в течение первых суток пребывания больного в стационаре. Мазок брали из обоих носовых ходов сухим ватным тампоном с последующим помещением его в пробирку с 0,5-1 мл среды. Для верификации возбудителей ОРВИ в клиническом материале использовали метод ПЦР с гибридизационно-флюоресцентной детекцией набором реагентов «АмплиСенсОРВИ-скрин-FL». Реакцию амплификации проводили при помощи прибора для ПЦР в режиме реального времени ДТ-96 («ДНК-технология», Россия). Исследование проводилось на базе ФГБУЗ ЦГиЭ № 59 ФМБА России. Из числа 64 пациентов больных гриппом А было 17 (27%) человек, 14 (22%) больных гриппом В, в 18 (28%) случаях диагностирована респираторно-синтициальная инфекция (РС-инфекция), в 15 (23%) случаях возбудитель не верифицирован (рис. 1); 43 из 64 пациентов - дети до 14 лет, из них 17 девочек и 26 мальчиков (рис. 2). Больным проводилось комплексное объективное и лабораторно-инструментальное обследование, в том числе общеклинические исследования крови, мочи и рентгенография органов грудной клетки. Кроме того, у данных пациентов был исследован уровень спонтанного и индуцированного γ-интерферона методом иммуноферментного анализа с применением набора реагентов «гамма-Интерферон-ИФА-Бест» (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Исследование проводилось в ЦНИЛ ПИУВ филиал ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России, Пенза. Учитывая, что референтные значения нормальных показателей для спонтанного γ-интерферона соответствуют 0-30 пг/мл, а для индуцированного - 50-780 пг/мл, забор крови проводили дважды - при поступлении и на 7-10-й день после начала лечения [16]. Лечение пациентов проводилось противовирусными препаратами в соответствии со стандартами медицинской помощи и клиническими рекомендациями. Статистический анализ проводили с помощью программы Statistica 10 Rus (StatSoft Inc. США). Исходные качественные и количественные показатели сравнивали с использованием t-критерия Стьюдента и критерия наименьшей значимой разности (НЗР) Фишера; для определения показателя достоверности р при сравнении признаков в малых группах больных применяли методику В.С. Геннеса. Результаты и обсуждение Методом ПЦР были верифицированы возбудители гриппа А, преимущественно А (Н3N2) и В, РС-вирусной инфекции у 64 пациентов, примерно в равных пропорциях, в 23% случаев возбудитель верифицирован не был (см. рис. 1). В группе обследуемых преобладали дети: 43 ребенка в возрасте от 3 мес до 14 лет, что составило 67% выборки, против 21 (33%) взрослых. Статистически значимых различий по полу среди пациентов не было. Отмечалось незначительное преобладание пациентов мужского пола среди группы с верифицированным диагнозом грипп А. Из табл. 1 видно, что не выявлено достоверных различий в показателях уровней спонтанного γ-интерферона до и после лечения и индуцированного γ-интерферона до и после лечения, но обнаружена достоверная разница (p ˂ 0,001) между показателями спонтанного и индуцированного γ-интерферонов. Однако уровень индуцированного γ-интер-ферона, определенный до лечения, значительно колебался в зависимости от нозологии вирусной инфекции. Так, при гриппе он был достоверно (р < 0,01) выше, чем при респираторно-син-цитиальной инфекции (вне зависимости от типа вируса гриппа). В то же время при гриппе В значения индуцированного γ-интерферона были достоверно (р < 0,03) выше, чем при гриппе А (табл. 2). Статистически значимых различий в уровне средних показателей спонтанного и индуцированного γ-интерферона (как до лечения, так и после лечения) среди пациентов мужского и женского пола выявлено не было (табл. 3). При исследовании спонтанного и индуцированного γ-интерферона у пациентов разных возрастных групп, обнаружено, что у пациентов старше 6 лет уровень индуцированного γ-интерферона был достоверно выше, чем у детей дошкольного возраста (табл. 4, 5). Заключение Результаты представленного исследования свидетельствуют о том, что противовирусная защита с участием γ-интерферона у больных гриппом и РС-инфекцией обеспечивалась преимущественно индуцированным γ-интерфероном, показатели которого значительно превышали уровни спонтанного γ-интерферона. Так, уровень спонтанного γ-интерферона у больных гриппом (А или В) и РС-инфекцией был низким, не зависел от этиологии и периода болезни, возраста пациентов и гендерных факторов. В то же время показатели индуцированного γ-интерферона зависели от этиологии заболевания, возраста пациентов и не зависели от гендерных факторов. Уровень индуцированного γ-интерферона до лечения был выше в 3,27 раза при гриппе В и в 2,32 раза при гриппе А, чем при РС-инфекции (p < 0,05). Уровень индуцированного γ-интерферона у больных гриппом и РС-инфекцией до и после лечения был достоверно выше (в 1,75 раза) у детей школьного возраста и взрослых, чем у дошкольников. Полученные в ходе исследования данные свидетельствуют также о необходимости дальнейшего изучения спонтанного и индуцированного γ-интерферона при гриппе и ОРВИ, в том числе для обоснования подходов к противовирусной терапии и целесообразности иммунокоррекции.

Об авторах

Ирина Петровна Баранова

Пензенский институт усовершенствования врачей - филиал ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России

Email: irinapetrovna.baranova@yandex.ru
доктор мед. наук, проф., заслуженный врач РФ, зав. каф. инфекционных болезней ПИУВ - филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России 440066, Пензенская обл., г. Пенза, Россия, ул. Стасова, д. 8А

Ирина Анатольевна Малова

ФГБУЗ «Медико-санитарная часть № 59» Федерального медико-биологического агентства России

Email: infekz@msch59.ru
аспирант каф. инфекционных болезней ПИУВ - филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, зав. инфекционным отд-нием ФГБУЗ МСЧ № 59 ФМБА России 442960, Пензенская обл., г. Заречный, Россия, ул. Спортивная, д. 8

Список литературы

Дополнительные файлы