Epidemiology and Infectious DiseasesEpidemiology and Infectious DiseasesЭпидемиология и инфекционные болезни3034-20073034-2015Eco-Vector4071410.17816/EID40714ArticlesСтатьиResearch ArticleTHE INFLUENCE OF SOME FACTORS ON THE FORMATION OF BIOFILM BY TOXIGENIC AND NON-TOXIGENIC VIBRIO CHOLERAE EL TOR STRAINSВлияние некоторых факторов на формирование биопленки токсигенными и атоксигенными холерными вибрионами эль-торTatarenkoO. A.ТатаренкоО. А

науч. сотр. группы гибридом лаб. экологии холеры Ростовского-на-Дону противочумного института

AlekseevaL. P.АлексееваЛ. П

д-р биол. наук, проф, вед. науч. сотр. группы гибридом лаборатории экологии холеры Ростовского-на-Дону противочумного института

TelesmanichN. R.ТелесманичН. Р

д-р биол. наук, зам. директора Ростовского-на-Дону противочумного института

ShestialtynovaI. S.ШестиалтыноваИ. С

канд. мед.наук, ст. науч. сотр. лаб. микробиологии холерных вибрионов Ростовского-на-Дону противочумного института

ChemisovaO. C.ЧемисоваО. С

канд. биол. наук, зав. музеем живых культур Ростовского-на-Дону противочумного института

MarkinaO. V.МаркинаО. В

канд. биол. наук, ст. науч. сотр. группы гибридом лаб. экологии холеры Ростовского-на-Дону противочумного института

NepomnyashchayaN. B.НепомнящаяН. Б

ст. науч. сотр. лаб. микробиологии холерных вибрионов Ростовского-на-Дону противочумного института

UskovaN. N.УсковаН. Н

мл. науч. сотр. лаб. микробиологии холерных вибрионов Ростовского-на-Дону противочумногог института.

Federal Treasury Institution of Healthcare "Rostov-on-Don Research Institute for Plague Control" of the Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Well-beingФКУЗ Ростовский - на-Дону научно исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора15102012175NO5 (2012)№5 (2012)364023072020Copyright ©; 2012, Eco-vectorCopyright ©; 2012, ООО "Эко-вектор"2012Eco-vectorООО "Эко-вектор"https://rjeid.com/1560-9529/article/view/40714

The early stages of biofilm formation on polystyrene surface were studied in 14 Vibrio cholerae El Tor strains, all of which carried genes of vps cluster, mshA, and hapR genes. 13 Vibrio cholerae El Tor strains were shown to be capable of adsorption on the walls of microtiter plate wells and of ring formation at the "polystyrene-medium" interface. One of the Vibrio cholerae El Tor strains tested was defective in this ability. The use of different media - modified M1 medium and 1 per cent peptone - failed to reveal sufficient influence of culture medium composition on the ability of Vibrio cholerae to form multilayer biofilm at the phase boundary "polystyrene-medium". Temperature reduction from 37°C to 25°C also didn t result in statistically significant enhancement of monolayer formation in both media. Quantitative evaluation of biofilm formation showed that this ability was clearly marked only in two toxigenic and two non-toxigenic strains of Vibrio cholerae El Tor. Monolayer comparison in ELISA demonstrated that only two toxigenic and two non-toxigenic strains possessed the ability for exopolysaccharide production.

Изучены первые этапы формирования биопленок у 14 штаммов Vibrio cholerae eltor, содержащих без исключения гены vps - кластера, mshA, hapR, на поверхности полистирола. Показано, что 13 штаммов Vibrio cholerae eltor обладали способностью адсорбироваться на стенках лунок и формировать кольцо на границе двух сред: полистирол - среда. У одного штамма Vibrio cholerae eltor такая способность отсутствовала. Применение модифицированной нами среды М9 и 1% пептонной воды не позволило нам установить существенное влияние состава сред культивирования на способность Vibrio cholerae eltor формировать монослойную пленку и ее представленность на границе фаз полистирол - среда. Снижение температуры от 37° до 25°С, также не приводило к статистически достоверному усилению формирования монослоев в обоих средах. В результате количественного определения степени формирования биопленки, выраженность этого признака отмечалась только у двух токсигенных и двух атоксигенных штаммов Vibrio cholerae eltor. Сравнение монослоев с использованием иммуноферментного анализа показало, что только два токси-генных и два атоксигенных штамма способны продуцировать экзополисахарид.

biofilmexopolysaccharideserumcholera vibrio (Vibrio cholerae)биопленкаэкзополисахаридсывороткахолерный вибрионЕлинов Н.П. Микробные экзополисахариды. - Киев, 1984.Колякина А.В., Курбатова Е.М., Телесманич Н.Р. и др. Сравнительное изучение углеводной специфичности лектиновых рецепторов холерных вибрионов при образовании биопленки на поверхности жидких питательных сред // Холера и патогенные для человека вибрионы: Материалы совещания и проблемной комиссии. - Ростов н/Д., 2008. - Вып. 21. - С. 72-74.Колякина А.В., Телесманич. Н.Р., Ломов Ю.М. Лектиновые рецепторы холерных вибрионов (адгезия, геммаглютинация, образование биопленки) // Холера и патогенные для человека вибрионы: Материалы совещания и проблемной комиссии. -Ростов н/Д., 2009. - Вып. 22. - С. 80-44.Куликалова Е.С., Урбанович Л.Я., Марамович. А.С. И др. Способность холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп к образованию биопленки в эксперименте // Холера и патогенные для человека вибрионы: Материалы совещания и проблемной комиссии. - Ростов н/Д., 2009. - Вып. 22. - С. 90-92.Чемисова О.С., Алексеева Л.П., Мазрухо Б.Л. И др. Изучение образования биопленок штаммами Vibrio cholerae eltor // Хо лера и патогенные для человека вибрионы: Материалы совещания и проблемной комиссии. - Ростов н/Д., 2008. - Вып. 21. - С. 72-74.Шелудько А.В., Кулибякина О.В., Широков А.А. и др. Влияние мутаций в синтезе липополисахаридов и полисахаридов, связывающих калькофлоур, на формирование биопленок Azospirillum brasilense // Микробиология. - 2008, Т. 77, № 3. - С. 358-363.Ali A., Rashid M.H., Karaolis D.K.R. High-Ffrequency rugose exopolysaccharide production by vibrio cholerae// Appl. Environ/ microbiol. - 2002. - Vol. 68, N 11. - P. 5773-5778.Fong J.C.N., Klose K.E., Yildiz, F.H. Role of Vibrio polysaccharide (vps) genes in VPS production, biofilm formation and Vibrio cholerae pathogenesis //J. Microbiol. - 2010. - Vol. 156, N 9. - P 2757-2769.Heydorn A., Nielsen, A. T., Hentzer M. et al. Quantification of biofilm structures by the novel computer program COMSTAT // Microbiology. - 2000. - Vol. 146. - P. 2395-2407.Lenz D.H., Bassler B.L. The small nucleoid protein Fis is involved in Vibrio cholerae quorum sensing // Mol. Microbiol. - 2007. - Vol. 63, N 3. - P. 859-871.Moorthy S., Watnick P.I. Identification of novel stage-specific genetic requirements through whole genome transcription profiling of Vibrio cholerae biofilm development//Mol. Microbiol. - 2005. - Vol. 57. -P. 1623-1635.Nadell C.D., Bassler B.L. A fitness trade-off between local competition and dispersal in Vibrio cholerae biofilms // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2011. - Vol. 108, N 34. - P. 14181-14185.Watnick P.I., Kolter R. Steps in the development of a Vibrio cholerae El Tor biofilm // J. Mol. Microbiol. - 1999. Vol. 34. - P. 586-595.