Epidemiology and Infectious DiseasesEpidemiology and Infectious DiseasesЭпидемиология и инфекционные болезни3034-20073034-2015Eco-Vector4054510.17816/EID40545ArticlesСтатьиThe production and properties of cholera Inaba-specific monoclonal antibodiesПолучение и свойства холерных Инаба-специфических моноклональных атителAlekseevaLyudmila PavlovnaАлексееваЛюдмила Павловна

д-р биол. наук, проф., рук. группы гибридом; ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

plague@aaanet.ruKruglikovV DКругликовВ Д

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

LomovYu MЛомовЮ М

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

EvdokimovaV VЕвдокимоваВ В

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

FateevaO FФатееваО Ф

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

YagovkinM EЯговкинМ Э

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

AlekseyevaL P

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

KruglikovV D

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

LomovYu M

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

EvdokimovaV V

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

FateyevaO F

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

YagovkinM E

Anti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don

ФГУЗ Научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-ДонуAnti-Plague Research Institute, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Rostov-on-Don15022011161NO1 (2011)№1 (2011)283123072020Copyright ©; 2011, Eco-vectorCopyright ©; 2011, ООО "Эко-вектор"2011Eco-vectorООО "Эко-вектор"https://rjeid.com/1560-9529/article/view/40545

Fusion of hyperimmune mouse splenocytes and NSO myeloma cells gave rise to a kit of hybridomas producing monoclonal antibodies (MAb) specific to Vibrio cholerae O1 serovar Inaba. The study of the properties of MAb showed that the latter of hybridomas A5 and E9 belonging to IgG and IgM, respectively, met the diagnostic requirements. The MAb preparations precipitated from hybridoma culture fluids may be used to identify only Vibrio cholerae O1 serovar Inaba in the slide agglutination and indirect immunofluorescence tests and dot immunoassay. The immunoblotting data suggest that Inaba-specific MAbs are directed towards the epitopes located in the polysaccharide chain of the polysaccharide from Vibrio Inaba. The resultant MAbs may be themselves used in serological tests for cholera and employed to design novel more perfect, diagnostic agents.

В результате слияния спленоцитов гипериммунных мышей и клеток миеломы NSO получен набор гибридом, продуцирующих моноклональные антитела (МКА), специфичные в отношении холерных вибрионов О1 серовара Инаба. Изучение свойств МКА показало, что диагностическим требованиям отвечают МКА гибридом А5, Е9, относящихся к классу IgG и IgM соответственно. Препараты МКА, осажденные из культуральных жидкостей гибридом, можно использовать для идентификации холерных вибрионов О1 только серовара Инаба в реакциях слайд-агглютинации, непрямой иммунофлюоресценции, дот-ИФА. Данные иммуноблота свидетельствуют, что Инаба-специфические МКА направлены к эпитопам, локализованным в полисахаридной цепи липополисахарида вибрионов Инаба. Полученные МКА сами можно использовать в серологических исследованиях на холеру, и на их основе возможно конструирование новых, более совершенных, диагностических препаратов.

Vibrio choleraemonoclonal antibodiesdiagnosisхолерный вибрионмоноклональные антителадиагностикаБурлакова О. С., Новохатский А. С., Бичуль К. Г., Дранов И. Ю. Моноклональные антитела к антигенам холерных вибрионов серовара Огава // Микробиол. журн. - 1989. - Т. 51, № 3. - С. 56-60.Егоров А. М., Осипов А. П., Дзантиев Б. Б., Гаврилова Е. М. Теория и практика иммуноферментного анализа. - М., 1991.Книрель Ю. А., Кочетков Н. К. Строение липополисахаридов грамотрицательных бактерий. II. Структура кора (Обзор) // Биохимия. - 1993. - Т. 58, вып. 2. - С. 182-201.Лобанов В. В., Сухарь В. В. Особенности липополисахарида холерных вибрионов //Журн. микробиол. - 2002. - № 2. - С. 102-107.Новохатский А. С., Бурлакова О. С. Моноклональные антитела к детерминантам О-антигена холерного вибриона О1-группы и перспективы их использования // Актуальные вопросы микробиологии, лабораторной диагностики и профилактики холеры: Тезисы Всесоюзной науч. конф. - Ростов н/Д, 1988. - С. 140-144.Colwell R. R., Hasan J. A., Huq A. et al. Development and evaluation of a rapid, simple, sensitive, monoclonal antibody-based co-agglutination test for direct detection of Vibrio cholerae O1 // FEMS Microbiol. Lett. - 1992. - Vol. 76, N 3. - P. 215- 219.Fazekas de St., Groth S. Production of monoclonal antibodies: strategy and tactics //J. Immunol. Meth. - 1980. - Vol. 35. - P. 1-21.Gustafsson B., Holme T. Monoclonal antibodies against group- and type-specific lipopolysaccharide antigens of Vibrio cholerae O1 // J. Clin. Microbiol. - 1984 - Vol. 20, N 6. - P. 1180- 1185.Hasan J. A., Bernstein D., Huq A. et al. Cholera DFA: an improved direct fluorescent monoclonal antibody staining kit for rapid detection and enumeration of Vibrio cholerae O1 // FEMS Microbiol. Lett. - 1994. - Vol. 120, N 1-2. - P. 143-148.Kohler G., Milstien C. Derivation of specific antibody-producing tissue culture and tumor lines by cell fusion // Eur. J. of Immunol. - 1976. - Vol. 6. - P. 511-519.Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. - 1970. - Vol. 227, N 5259. - P. 680-685.Ouchterlony O. Antigen-antibody reactions on gels // Acta Pathol. Microbiol. Scand. - 1949. - Vol. 49. - P. 5007- 5017.Reik L. M., Maines S. L. A simple non-chromatographic purification procedure for monoclonal antibodies // J. Immunol. Meth. - 1987. - Vol. 100. - P. 123.Towbin H., Gordon J. Immunoblotting and dot immunobinding - Current status and outlook // J. Immunol. Methods. - 1984. - Vol. 72. - P. 313-340.